安全使用生物安全柜的操作說明

在實驗室中使用生物安全柜

1. 位置 空氣通過前面開口進入生物安全柜的速度大約為0.45m/s。這樣速度的定向氣 流是極易受到干擾的，包括人員走近生物安全柜所形成的氣流，打開窗戶，送 風(fēng)系統(tǒng)調(diào)整以及開關(guān)門等都可能造成影響。

因此，zui為理想的是，生物安全柜應(yīng)位于人員活動，物品流動以及可能會擾亂 氣流的地方。在安全柜的后方以及每一個側(cè)面要盡可能留有30cm的空間，以利 用對安全柜的維護。在安全柜的上面應(yīng)留有30-35cm的空間，以便準(zhǔn)確測量空 氣通過排風(fēng)過濾器的速度，并便于排風(fēng)過濾器的更換。

2. 操作人員 生物安全柜如果使用不當(dāng)，其防護作用就可能大大地受到影響。操作人員在移 動雙臂進出安全柜時，需要小心維持前面開口處氣流的完整性，雙臂應(yīng)該垂直 地緩慢進出前面的開口。

手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約一分鐘，以便安全柜調(diào)整完畢并且讓里 面的空氣"掃過"手和雙臂的表面以后，才可以開始對物品進行處理。要在開 始實驗之前將所有必須的物品置于安全柜內(nèi)，以盡可能減少雙臂進出前面開口 的次數(shù)。

3.物品放置 二級生物安全柜前面的進氣格柵不能被紙，儀器設(shè)備或其他物品阻擋。放入安 全柜內(nèi)的物品應(yīng)采用70%酒精來消除表面污染?？梢栽谙緞┙竦拿砩线M 行實驗，以吸收可能濺出的液滴。

所有物品應(yīng)盡可能地放在工作臺后部靠近工作臺邊緣的位置，并使其在操作中 不會阻擋候補格柵。可產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備（例如混勻器，離心機等）應(yīng)靠近安全 柜的后部放置。像有生物危害性的廢棄物袋，盛放廢棄吸管的盤子以及吸濾瓶 等體積較大的物品，應(yīng)該放在安全柜內(nèi)的某一側(cè)。在工作臺面上的實驗操作應(yīng) 該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進行。

耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤不應(yīng)放在安全柜的外面，否 則在使用這些物品時雙臂就必須頻繁進出安全柜，這樣會干擾安全柜空氣屏障 的完整性，從而影響對人員和物品的防護。

4.操作和維護 大多數(shù)生物安全柜的設(shè)計允許全天24小時工作。研究人員還發(fā)現(xiàn)，連續(xù)工作有 助于控制實驗室中灰塵和顆粒的水平。向房間中排風(fēng)或通過套管接口與專門的 排風(fēng)管相連接的一級A1和A2型生物安全柜，在不使用時是可以關(guān)閉的。其他如 二級B1和二級B2型生物安全柜，是通過硬管安裝的，就必須始終保持空氣流動 以維持房間空氣的平衡。

在開始工作以前以及完成工作以后，應(yīng)至少讓安全柜工作5分鐘來完成"凈 化"的過程，應(yīng)即應(yīng)留在將污染的空氣派出安全柜的時間。

生物安全柜的所有維修工作應(yīng)該由有資質(zhì)的專業(yè)人員來進行。在生物安全柜操 作中出現(xiàn)的任何故障都應(yīng)該報告，并應(yīng)在再次使用之前進行維修。

5.紫外燈 生物安全柜中不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話，應(yīng)該每周進行清潔，以除 去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢。在安全柜重新認(rèn)證時，要檢查紫外線的 強度，以確保有適當(dāng)?shù)墓獍l(fā)射量。房間中有人時一定要關(guān)閉紫外燈，以保護眼 睛和皮膚，避免因不慎暴露而造成傷害。

6.明火 在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中，應(yīng)避免使用明火。使用明 火會對氣流產(chǎn)生影響，并且在處理揮發(fā)性物品和易燃物品時，也易造成危險。 在對接種環(huán)進行滅菌時，可以使用微型燃燒器或電爐，而不應(yīng)使用明火。

7. 溢出 實驗室中要張貼如何處理溢出物的實驗室操作規(guī)則，每一位使用實驗室的成員 都要閱讀并理解這些規(guī)程。一旦在生物安全柜中發(fā)生由生物學(xué)危害的物品溢 出時，應(yīng)在安全柜出于工作狀態(tài)下立即進行清理。要使用有效的消毒劑，并在 處理過程中盡可能減少氣溶膠的生成。所有接觸溢出物品的材料都要進行消 毒/或高壓滅菌。

8. 認(rèn)證 在安裝是一季每隔一定時間以后，應(yīng)由有資質(zhì)的專業(yè)人員按照生產(chǎn)商的說明對 每一臺生物安全柜的運行性能以及完整性進行認(rèn)證，以檢查其是否符合國家及 的性能標(biāo)準(zhǔn)。安全柜防護效果的評估應(yīng)該包括對安全柜的完整性，HEPA過 濾器的泄漏，向下氣流的速度，正面氣流的速度，負(fù)壓/換氣次數(shù)，氣流的煙 霧模式以及警報和互鎖系統(tǒng)進行測試。

還可以選擇進行漏電，光照度，紫外線強度，噪聲水平以及震動性的測試。在 進行這些測試時，檢測人員要經(jīng)過專門的培訓(xùn)，采用專門的技術(shù)和儀器設(shè)備。 強烈建議由有資質(zhì)的專業(yè)人員來進行測試。

9. 清潔和消毒 由于剩余的培養(yǎng)基可能會使微生物生長繁殖，因此在實驗結(jié)束時，包括儀器設(shè) 備在內(nèi)的生物安全柜里的所有物品都應(yīng)清楚表面污染，并移出安全柜。

在每次使用前后，要清除生物安全柜內(nèi)表面的污染。工作臺面和內(nèi)壁要用消毒 劑進行擦拭，所用的消毒劑要能夠殺死安全柜里可能發(fā)現(xiàn)的任何微生物。在每 天試驗結(jié)束時，應(yīng)擦拭生物安全柜的工作臺面，四周以及玻璃的內(nèi)外側(cè)等部位 來清除表面的污染。在對目標(biāo)生物體有效時，可以采用漂白劑溶液或70%酒精 來消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑后，還必須用無菌水再次進行擦拭。

推薦將安全柜一直維持運行狀態(tài)。如果要關(guān)閉的話，則應(yīng)在關(guān)機前運行5分鐘 以凈化內(nèi)部的氣體。

10. 清除污染 生物安全柜在移動以及更換過濾器之前，必須清除污染。zui常用的方法是采用 甲醛蒸汽熏蒸。應(yīng)該由有資質(zhì)的專業(yè)人員來清除生物安全柜的污染。

11.個體防護裝備 在使用生物安全柜時應(yīng)穿著個體防護服。在進行一級和二級生物安全水平的操 作時，可穿著普通試驗服。前面加固處理的反背式試驗隔離衣具有更好的防護 效果，應(yīng)在進行三級和四級生物安全水平（防護服型實驗室除外）的操作時使 用。手套應(yīng)套在隔離衣的外面，可以戴加有松緊帶的套袖來保護研究人員的手 腕。有些操作可能還需要戴口罩和安全眼鏡。

12.警報器 可以在兩種警報器中選擇一種來裝備生物安全柜。窗式警報器只能裝在帶有滑 動窗的安全柜上。發(fā)出警報時表明操作者將滑動窗移到了不當(dāng)?shù)奈恢?。處理這 種警報時，只要將滑動窗移到適宜的位置就可以了。氣流警報器報警時，表明 安全柜的正常氣流模式受到了干擾，操作者或物品當(dāng)即處于危險狀態(tài)。當(dāng)氣流 警報響起時，應(yīng)立刻停止工作，并通知實驗室主管。生產(chǎn)商的說明手冊中將提 供更詳細(xì)的資料，在生物安全柜的使用培訓(xùn)中也應(yīng)包括這一方面的內(nèi)容。